药典规定,原始种子应验明其历史、来源(包括重组工程菌毒种的构建过程)和生物学特性。
耀海生物:重组工程菌种构建及优势菌筛选服务
耀海生物依托大肠杆菌和酵母菌分子构建工艺平台,可提供重组工程菌种构建和优势菌筛选服务,及提供来源清晰、具备标准COA报告的质粒和宿主细胞。
耀海生物大肠杆菌表达系统包括常用的pET系列载体,常用的宿主细胞有DH5α、TOP10、BL21(DE3)、BL21 star(DE3)、BL21 AI等广泛使用的表达菌株。
耀海生物酵母表达系统包括pPIC9k、Pinka-HC与pPICZa系列载体,常用的宿主细胞包括SMD1168H、X-33、GS115、PichiaPink strain1/2/3/4等广泛使用的表达菌株。
服务特色
01
多宿主菌转化平台
大肠杆菌包括DH5α、TOP10、Trans10及BL21衍生菌;
酵母菌包括SMD1168H、X-33、GS115、PichiaPink strain1/2/3/4;
宿主菌来源清晰、具备标准CoA报告;
平台工艺,优先选择专利超期的宿主菌,以避开专利限制。
02
多样化抗性标记
无抗生素或基于法规指导下的抗生素选择,可满足监管要求。
03
优势菌筛选平台
平台具备一定的筛选通量,单次可筛选100+菌株。
04
良好的记录书写规范
确保重组工程菌种的构建流程可溯源,满足法规要求。
服务案例
项目背景:某重组蛋白项目,以大肠杆菌为表达体系,重组蛋白以胞内可溶性蛋白形式表达。
菌种构建与筛选流程:
由客户提供重组质粒和初始表达菌种,耀海将重组质粒转化至三种不同的BL21衍生菌种,用于筛选优势宿主菌。
以目的蛋白占比为导向,先后经过优势宿主菌筛选、优势宿主的优势菌种筛选、优势菌株单克隆纯化,以耀海特有的平台化工艺,高效收获了高蛋白产量、高传代稳定性的优势菌种。